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    跌打损伤凝胶膏中盐酸麻黄碱和龙脑的含量测定
     
    文档类型 doc 更新日期 2018-03-23 10:11
    文件大小 0.14M 浏览次数 1827
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    详细介绍
     
     跌打损伤凝胶膏是我院临床医生根据相关的中医药文献资料并结合自己的临床经验研制而成的具有治疗跌打损伤作用的临床经验方。处方由三七、白芷、木香、乳香、没药、麻黄和冰片七味中药组成,具有活血散瘀,消肿止痛的功效,临床疗效确切。跌打损伤验方多以养血活血化瘀为主,乳香、没药出现频次较高,二药入血分,散瘀止痛力强。从统计的结果看,温热药出现的频次多于寒凉药[a、b]。本文采用高效液相色谱法对麻黄中的有效成分盐酸麻黄碱进行含量测定,采用气相色谱法对冰片中的挥发性成分龙脑进行含量测定,旨在为该方的进一步研发奠定基础。
    1 仪器和试药
    HP 1100高效液相色谱仪;HP 6890N 气相色谱仪;盐酸麻黄碱对照品(批号171242-200805)、龙脑对照品(批号110881—200906)、水杨酸甲酯对照品(批号110707—200910)均购于中国药品生物制品检定所;甲醇、四氢呋喃(色谱纯,天津市康科德科技有限公司),磷酸(分析纯,天津市化学试剂三厂),乙腈(色谱纯,美国Fisher公司),95%乙醇、盐酸(分析纯,天津市康科德科技有限公司),甲酸(分析纯,天津市化学试剂三厂),双蒸水(实验室自制),跌打损伤凝胶膏(自制)。
    2 方法和结果
    2.1 盐酸麻黄碱
    2.1.1 色谱条件[1-3]
    Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇(A)-0.02 mol?l-1磷酸二氢钾与0.4%三乙胺水溶液(B),用10% H3PO4调pH值至2.5-3.0;A:B=8:92,等度洗脱;检测波长:207 nm;柱温:30 ℃;流速1 ml?min-1。理论塔板数按盐酸麻黄碱计算不低于8000。
    2.1.2 溶液配制
    对照品溶液的制备:精密称取盐酸麻黄碱对照品12.65 mg,置100 mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品贮备液;再精密量取1 mL置25 mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液,置冰箱冷藏保存备用。
    供试品溶解的制备:取跌打损伤凝胶膏1片,用剪刀剪碎,除去盖衬,置于锥形瓶中,精密吸取氨水2 ml并量取氯仿98 ml加于锥形瓶中,称定重量,超声处理20 分钟,室温放置至冷,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,摇匀,滤过,续滤液备用,量取50 ml续滤液,减压浓缩蒸干,加流动相超声溶解置于25 ml量瓶中并稀释至刻度,滤过,取续滤液为供试品溶液。
    辅料对照溶液:取空白辅料一片,同法操作,制得辅料对照溶液。
    阴性对照溶液:根据跌打损伤凝胶膏的处方制备不含麻黄的阴性样品,照供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。
    2.1.3 方法学考察
    2.1.3.1 专属性考察
    精密吸取2.1.2项下的对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液、辅料对照溶液各20 µL注入液相色谱仪,在上述色谱条件下得到相应色谱图。结果处方中其他成分和辅料对结果没有影响,方法专属性良好。见图1。

    图1 盐酸麻黄碱专属性试验
    1. 盐酸麻黄碱 a.阴性对照溶液 b. 辅料对照溶液 c.对照品溶液 d. 供试品品溶液
    2.1.3.2 线性范围的考察
    精密吸取对照品贮备液(浓度0.1265 mg.ml-1)0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL移入25 mL量瓶中,加流动性稀释至刻度,摇匀,即得到6种不同浓度的对照品溶液。按上述测定方法,各20 µL注入液相色谱仪,记录色谱图。以对照品盐酸麻黄碱(ng)的进样量为横坐标,以盐酸麻黄碱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。其回归方程为方Y=2.3227X-5.6256,相关系数r=0.9999,结果表明盐酸麻黄碱在50.6~506ng范围内线性关系良好。
    2.1.3.3 精密度试验
    精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液(浓度0.01012mg.ml-1)20µL注入液相色谱仪,重复进样6次,测定盐酸麻黄碱峰面积,结果RSD为0.84%(n=6),表明方法精密度良好。
    2.1.3.4 重复性试验
    取同一批样品6份,按2.1.2溶液配制项下供试品溶液的制备方法制备,进样量为20 µL,按上述色谱条件测定样品中盐酸麻黄碱的含量,结果每片平均含量为6.85 µg?cm-2,RSD为1.52%(n=6),表明本法重复性良好。
     


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